HPLC液相色譜儀采用了電熱降膜蒸發(fā)原理,即利用已被預(yù)熱(80℃)了的水降淋,在電熱管的外表形成高溫(80℃)液膜并立刻蒸發(fā),產(chǎn)生一次純蒸汽(127℃),并作為下一效的熱源,再經(jīng)過一次熱交換又產(chǎn)生二次純蒸汽作為下一效的熱源,同時產(chǎn)生的凝水就是蒸餾水,經(jīng)過六次熱交換就可使電熱的有效利用率提高了43%。
為了減少HPLC液相色譜儀出現(xiàn)故障的頻率從而延長其使用壽命,定期的維護保養(yǎng)十分關(guān)鍵,下面我們來分享一些正確的維護保養(yǎng)方法。
1.一切分析準(zhǔn)備工作做好后,依次按順序打開穩(wěn)壓電源、高壓輸液泵、柱溫箱、檢測器,待以上各部件自檢結(jié)束后,打開連接儀器的電腦,啟動工作軟件。
儀器分析工作結(jié)束后,關(guān)閉工作軟件,再依次按順序關(guān)閉檢測器、柱溫箱、高壓輸液泵。
2.對流動相的要求
液相色譜所用的流動相一般為低沸點有機溶劑與水或者緩沖溶液的混合物。為保證液相色譜儀器的正常使用,所有流動相必須是色譜級的,且經(jīng)過過濾雜質(zhì)、排除氣泡后裝入干凈的流動相貯存瓶中待用。
3.流動相的物理性能要求
對分析物要有足夠的溶解能力,以利于提高檢驗的靈敏度;流動相的黏度要小,以保證合適的柱降壓;流動相的沸點要低,以利于制備分離時樣品的回收;
4.流動相的溫度
一般以硅膠為基質(zhì)的色譜柱高使用溫度不超過60℃,以低于40℃為宜。溫度過高會加速鍵合相水解和硅膠的溶解,從而使填料性質(zhì)改變,柱塌陷,降低柱效。低使用溫度不超過0℃。
5.流動相的過濾
所有流動相在使用前都必須經(jīng)過0.45μm(或0.22μm)的有機相/脂溶性和水相(水溶性)濾膜過濾,以除去雜質(zhì)微粒。
6.流動相的脫氣
液相色譜所用到的流動相必須預(yù)先脫氣,否則容易在系統(tǒng)內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響泵的工作, 影響基線的穩(wěn)定性。此外,溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相反應(yīng)。溶解氧能與某些有機溶劑(如甲醛、4氫呋喃)形成有紫外吸收的絡(luò)合物,提高背景吸收,會在梯度洗脫時造成基線漂移或形成鬼峰。
以上就是HPLC液相色譜儀定期的維護保養(yǎng)方法,希望能幫助大家更好地使用該儀器。